在生物和生化研究中,缓冲剂是保持实验条件稳定和准确的重要试剂。Bis-Tris(双(2-羟乙基)氨基甲烷)作为一种非常流行的两性离子生物缓冲剂,广泛应用于各种生物化学实验中,尤其在电泳缓冲体系中具有重要作用。下面将详细和大家聊聊Bis-Tris的性质、应用及其在电泳缓冲体系中的作用。
一、Bis-Tris的性质
Bis-Tris是双(2-羟乙基)氨基甲烷的简称,分子式C8H19NO5,分子量209.24 g/mol,兼具两个不同结构家族的官能团:双(2-羟乙基)胺家族和Tris家族。它的pKa值为6.46,使其在pH 5.8到7.2范围内成为理想的缓冲剂。这使得Bis-Tris在许多生物和生化实验中具有广泛的应用。
此外,Bis-Tris易溶于水,形成无色透明的溶液。它在不同温度和离子强度下均能保持良好的缓冲能力,具有很好的化学稳定性。这些性质使得Bis-Tris成为电泳实验中理想的缓冲剂选择。
二、Bis-Tris在电泳缓冲体系中的应用
1、电泳缓冲液
电泳是分离和分析蛋白质、核酸等生物大分子的重要技术。Bis-Tris在电泳实验中常用作电泳缓冲液。它的作用主要体现在以下几个方面:
(1)维持稳定的pH值:在电泳过程中,样品中的生物大分子会在电场作用下移动。如果缓冲液的pH不稳定,可能会导致样品分子的电荷发生变化,进而影响电泳分离的效果。Bis-Tris的缓冲范围为pH 5.8 - 7.2,能够在这一范围内稳定地维持pH值,从而有利于电泳结果的准确。
(2)减少电泳过程中的电荷变化:由于Bis-Tris具有两性离子的特性,它可以在某些程度上中和样品分子的电荷,减少电泳过程中因电荷变化引起的迁移差异,从而提高分离效果。
2、凝胶缓冲液
在凝胶电泳中,凝胶缓冲液的选择同样重要。Bis-Tris作为凝胶缓冲液的主要优点包括:
(1)与琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶兼容:Bis-Tris可以用于琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶电泳。在琼脂糖凝胶电泳中,Bis-Tris能够提供稳定的缓冲环境,分离不同分子量的核酸片段。在聚丙烯酰胺凝胶电泳中,Bis-Tris能确保蛋白质分离的高分辨率。
(2)较低的背景电流:在电泳过程中,背景电流会影响分离的清晰度。Bis-Tris作为凝胶缓冲液,能够减少背景电流,提高电泳分离的清晰度。
3、样品缓冲液
Bis-Tris还常用于电泳实验中的样品缓冲液,主要作用包括:
(1)保护样品:在样品准备过程中,保持样品的pH稳定对于保护生物大分子的结构和功能很关键。Bis-Tris作为样品缓冲液,能够在准备和加载样品时提供稳定的pH环境,保护样品分子。
(2)增强分离效果:通过调节样品缓冲液的pH和离子强度,Bis-Tris可以优化样品在电泳中的迁移行为,从而提高分离效果。
Bis-Tris作为一种重要的两性离子生物缓冲剂,在电泳缓冲体系中应用广泛。它能够在pH 5.8-7.2范围内提供稳定的缓冲环境,保护样品分子,并提高分离效果。
德晟生产的高纯度Bis-Tris,具有良好的溶解性和稳定性,广泛应用于各种生物和生化实验中。通过了解Bis-Tris的性质和在电泳体系中的应用,实验人员可以在设计和操作实验时选择符合自己要求的缓冲液,从而有利于实验结果。因德晟是厂家出售,产品类型规格齐全,经验丰富,已出口多个国家和地区,深受市场认可和好评。目前仓库内有现货,低价促销,如果您有意向,欢迎随时点击网站咨询详情购买!