在临床检验和实验室分析中,抗凝剂的使用很普遍。乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)是一种常用的抗凝剂,主要用于血液样本的保存和分析。EDTA二钾能够螯合血液中的钙离子,阻止凝血过程。然而,厂家制备时一些新手很容易忽视EDTA二钾与血液的比例问题。
一、EDTA二钾抗凝剂的作用原理
EDTA(乙二胺四乙酸)是一种强有力的螯合剂,能够与金属离子(如钙离子)形成稳定的络合物,从而阻止凝血酶原向凝血酶的转化,抑制凝血过程。EDTA二钾是EDTA的二钾盐形式,常用于血液标本的抗凝处理,特别是在血液常规检查、血液生化分析、血型鉴定和分子生物学检测等方面具有广泛应用。
二、影响EDTA二钾与血液比例不对的原因
在实际操作中,影响的主要原因有以下几点:
1、添加量不准确:在手工操作或自动化仪器中,EDTA二钾的添加量如果不准确,会导致比例失调。一般根据行业标准剂量范围为每毫升血液加入1.5-2.2mg EDTA 二钾。
2、血液量不足:采血过程中,如果血液量不足,导致抗凝剂相对过量。
3、混合不均匀:采血后未能充分混匀,导致抗凝剂在血液中分布不均。
三、EDTA二钾与血液比例不对的影响
1、血液稀释效应:EDTA二钾比例过高时,会造成血液样本的稀释效应,这会直接影响血液细胞计数和血液生化参数的测定。例如,血常规检测中,白细胞、红细胞和血小板的计数结果会被低估,导致误诊或漏诊。
2、红细胞形态改变:过高浓度的EDTA二钾会导致红细胞发生皱缩和形态改变,影响红细胞形态学检查。红细胞形态的改变会干扰血涂片的显微镜观察,使得红细胞形态学分析结果不准确。
3、血小板聚集:比例过高的EDTA二钾可能导致血小板的聚集,从而影响血小板计数和功能检测。血小板聚集会干扰血小板计数仪的正常工作,导致计数结果不准确。
4、血液化学指标变化:EDTA二钾对某些血液化学指标也有直接影响。例如,EDTA会螯合血液中的钙离子,使得钙离子浓度测定结果显著降低。此外,EDTA二钾过量还可能影响其他金属离子的测定,如镁、锌等,进而影响相关生化指标的准确性。
四、防止EDTA二钾与血液比例不对的措施
1、准确控制EDTA二钾的添加量:无论是手工操作还是自动化仪器,都应确保EDTA二钾的添加量准确无误。可以采用精密的移液器或自动分液器,严格按照标准操作规程(SOP)进行操作,避免因添加量不准确而导致的比例失调。
2、确保采血量充足:采血过程中应确保采血管中的血液量达到标定量,避免因血液量不足导致的抗凝剂过量。可在采血后立即检查血液量,若有需要应重新采血。
3、充分混匀:采血后应立即轻轻倒置混匀采血管,确保EDTA二钾在血液中均匀分布,通常建议倒置混匀5-10次,使抗凝剂与血液充分接触,从而避免局部浓度过高。
4、定期校准检测设备:定期校准血液分析设备,确保设备在较佳状态下运行,避免因设备故障或校准不准导致的检测误差。
EDTA二钾抗凝剂在血液样本处理中的应用十分广泛,但其与血液的比例要严格控制,才能确保样本的质量和检测结果。通过准确控制添加量、确保采血量充足、充分混匀样本以及定期校准检测设备等方式,可以避免因比例不对导致的问题。
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