4-羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES在细胞培养基中的作用
细胞培养基是给细胞提供营养促进生长的基础物质,也是培养细胞的重要的生长环境因素,细胞培养基中通常含有PH调整液、平衡盐水、细胞消化液、抗生素溶液等。那什么情况下细胞培养基中需要添加HEPES呢?它又起到什么作用?我们一起来了解下。
1、HEPES在细胞培养基中的作用
大家都知道HEPES是一种生物缓冲剂,所以它在细胞培养基的重要组成因素中当然是PH调整液了。因为培养基中需要保持足够的碳酸氢盐以达到获取营养目的,这就需要HEPES提供额外的缓冲能力,HEPES缓冲介质可抵抗急剧的pH变化,但不能完全阻止pH的变化。值得注意的是,在使用HEPES缓冲剂时一定配置成合适的使用浓度,否则浓度过高会引发细胞毒性,影响整个实验。
可以使用别的缓冲剂代替HEPES吗?
虽然市面上其它的生物缓冲剂种类很多,但是由于多数细胞培养的生长环境PH区间值保持在7.2-7.4之间比较好,而这又刚好在HEPES缓冲剂的有效缓冲范围之内,所以与其它缓冲剂相比,HEPES无疑是具有优势的。但是根据自己的实验需求,也可以酌情选择别的缓冲液使用。
上述对HEPES在细胞培养基中的作用做了详细说明。HEPES除了用于细胞培养之外,还广泛用于组织培养,蛋白质纯化和提取,免疫沉淀,细胞裂解,活细胞成像和其他生物/生化研究等。
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